眾所周知，動物無害化處理工作是動物疫病防 控的最后一道關口，是保障食品安全和公共衛生安 全的重要 舉 措。作為動物無害化處理工作的重要 環節，運 輸 車 輛 的 消 毒 顯 得 尤 為 重 要。很 多 情 況 下，動物無害化處理廠確實是對運輸車輛進行了消 毒，但消毒效 果 如 何 卻 無 從 得 知，是否有致病微生 物殘留也不可知。一旦發生消毒劑保存不當、消毒 濃度配制不 合 理、預制消毒溶液失效等問題，特 別 是在重大動 物 疫 病 如 非 洲 豬 瘟、禽流感流行期間， 消毒效果得不到保障，將對動物疫病防控造成嚴重 后果。本研究主要從細菌殺滅率、病毒殺滅情況兩 個方面對運輸車輛消毒效果進行綜合評估，為開展 相關工作提供數據支撐。

主要成分為月芐三甲氯銨，購自上海騎驃動物保健品公司，用于運輸車輛沖 洗 消 毒；益歐迪復合消毒藥，主要成分為癸甲溴銨、碘，購自上海康利得動物藥品有限公 司，用于運輸 車 輛 噴 霧 消 毒；消毒溶液濃度均按照 推薦濃度配比使用。

本文所指運輸車輛為新型動物 無害化收集轉運特種車輛，該車輛在全國動物無害 化處理領域內率先被國家工信部批準為特種車輛， 并配備 了 消 毒 噴 霧 設 施、ＧＰＳ定 位 系 統、車 輛 行 車 跟蹤記錄系統、防污水泄漏裝置等。

ＰＣＲ儀、水平凝膠電泳儀、凝 膠 成 像 系 統 （Ｂｉｏ－ｒａｄ，型 號 ＧｅｌｄｏｃＥＺ）、 高 速 冷 凍 離 心 機（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ，型 號 ＰｒｉｍｏＲ）、 生 物 安 全 柜（ＥＳＣＯ，型 號 ＡＣ２－４Ｓ１）、超 凈 工 作 臺 （蘇 凈 安 泰，型 號 ＳＷ－ＣＪ－１Ｆ）、隔 水 式 恒 溫 培 養 箱（上海精宏實驗設備有限公司，型 號 ＧＮＰ９０５０）、 漩 渦 混 合 器 （海門其林貝爾儀器制造 有限公司， 型 號 ＶＯＲＴＥＸ－５）。

豬圓環病毒２型（ＰＣＶ２）毒株由上海 創宏生物科技有限公司提供，病毒 ＰＣＲ陽性對照由 捷瑞生物工 程 有 限 公 司 合 成；病 毒 提 取 試 劑 盒、其 他相關 試 劑 購 自 天 根 生 化 科 技 （北 京）有 限 公 司； ０．８５％生理鹽 水（含 中 和 劑）采 樣 管 購 自 友 康 恒 業 生物科技（北京）有限公司；平板計數瓊脂購自青島 海博生物技術有限公司。

運輸車輛駛離動物無害化處理 廠前，需要進行沖洗消毒和噴霧消毒。沖洗消毒使 用月芐三甲氯銨溶液，每次沖洗消毒時水流均完全 覆蓋車廂內外表面，至少３次；噴霧消毒使用益歐迪 復合消毒藥，６８對霧化噴頭噴霧，噴霧時間３０ｓ，霧 粒直徑為５０～６０μｍ，霧粒完全覆蓋運輸車輛車廂 外表面（包括車廂頂部）。

（１）采 樣 時 間：運 輸 車 輛 駛 入 動 物 無 害化處理廠 大 門 前，對 其 車 廂 外 表 面 進 行 采 樣；卸 貨完畢，沖洗消毒前，對車廂內表面進行采樣；沖洗 消毒和噴霧消毒后，運輸車輛駛離動物無害化處理 廠大門前，對其車廂內、外表面進行采樣。

（２）采樣 方法：用 ５ｃｍ×５ｃｍ 的標準滅菌規格板，放在被檢 車廂表面，連續采樣４個，內、外表面采樣面積均為 １００ｃｍ２，用浸有含相應中和劑的無菌生理鹽水棉拭 子１支，在規格板內橫豎往返均勻涂擦各５次，并隨 之轉動棉拭子，將棉拭子投入１０ｍＬ含相應中和劑 的無菌生理鹽水采樣管內，立即送檢。

本報告選取１輛死亡動物運輸車 輛駛入前、消毒前、駛離前監測樣品，漩渦混合器震 蕩混勻２０ｓ后，使 用 １ ｍＬ 微量移液器吸取樣品１ｍＬ，沿管壁緩緩注入盛有９ｍＬ 無菌生理鹽水的 試管中，震蕩試管混合均勻，制成１∶１０樣品勻液，以 此類推，分別將樣品１∶１００、１∶１０００、１∶１００００…… 進行１０倍遞增稀釋，每個稀釋度吸取１ｍＬ樣品勻 液于無菌平皿內，每個稀釋度做２個平皿，同時，分 別吸取１ｍＬ空白稀釋液加入２個無菌平皿內作為 空白對照。及時吸取１５～２０ｍＬ冷卻至４６ ℃的平 板計數瓊脂 培 養 基傾注平皿，并轉動平皿使其混合均勻。待 瓊脂凝固后，將平板翻轉，（３６±１）℃培養（４８±２）ｈ， 取出進行 細 菌 計 數。本次樣品中可能含有在瓊脂 表面彌漫生長的菌落，因此可在凝固的瓊脂表面覆 蓋一薄層瓊脂培養基（約４ｍＬ），凝固后翻轉平板， 按照上述條件進行培養。

本報告選取１輛死亡動物運輸車輛監測細菌殺 滅情 況，結果表明該車 輛內表面細菌殺滅率 ≥ ９０％，具體見表２、表３。

３ 結果分析
　　

從細菌殺滅率、病毒殺滅情況兩個 方面對運 輸 車 輛 消 毒 效 果 進 行 綜 合 評 估。從 樣 品 的監測結果來看，死亡動物運輸車輛駛入動物無害化處理廠直至離開，經過卸貨、消毒，車輛外表面細 菌殺滅率≥９０％，確保了該類車輛在城市道路行駛 期間的公共衛生安全；同時本研究對車廂內表面病 毒殘留進行 監 測，發現在未經消毒情況下，車 廂 內 表面血污水污染較為嚴重，采集樣品中發現 ＰＣＶ２ 陽性，經過消 毒 處 理 達 到 ＰＣＶ２ 陰性，確 保 了 該 車 輛在養殖場、收集點等需要打開車廂進行裝卸病死 動物過程中不會造成病原擴散。 運輸車輛可能攜帶的致病微生物必須引起重 視。運輸 過 程 中，由 于 病 死 動 物 個 體 太 大 無 法 包 裝、包裝物不密封、血污水滲漏等原因，導致運輸車 輛車廂污 染 較 為 嚴 重。筆者對車廂內表面消毒前 血污水樣品進行調查，發現血污水中可能殘留有大 量的致病 微 生 物。本 研 究 選 取 ＰＣＶ２ 作為 特 定 病 原微生物對運輸車輛消毒效果進行判定，旨在引起 行業內相關工作人員對運輸車輛消毒效果評估的關注。